人磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)ELISA试剂盒仅供科研实验

来源：上海笃玛生物科技有限公司 时间：2024-06-29 10:31:02 [举报]

人磷脂酶A2蛋白(PLAA)ELISA试剂盒 仅供科研实验

做好对照

正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特反应，可采用羊、兔或BSA等封闭。

实验条件的选择

在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:

（1）　固相载体的选择：许多可作为固相载体，如聚氯、聚、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

（2） 包被（或抗原）的选择：将（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。

（3）　酶标记工作浓度的选择：用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度）在正式实验里准确地滴定其工作浓度。

（4）　酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

进口分装：

检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。

试剂盒的曲线

试剂盒的曲线相关系数R≥0.98。

试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均＜9 %。

试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。

检测及酶结合物的稀释度(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，实验结果的重复性。

白介素6是一种细胞因子,已被证实为B细胞分化因子.它是一种形成,它的特性,如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的等,也备受关注. 并且已证实白介素-6与病理学存在的相关关系.例如,报道多种的生长因子为白介素-6, 瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体.此外, 白介素6在多种炎性和自身发挥重要的作用. 此试剂盒能高灵敏度的检测小鼠和细胞基质上清的白介素6 原理 此试剂盒运用了两种特,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 10.94的 700 pg/mL 预期用途

人磷脂酶A2蛋白(PLAA)ELISA试剂盒 仅供科研实验

安全性

1． 避免直接终止液和底物A、B。一旦到这些，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的品应丢弃，不可保存。

5． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

6． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

8． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光，避免长时间于光下。避免用手，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

11． 加入试剂的顺序应一致，以所有反应板孔温育的时间一样。

12． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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