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  • 绵羊血管紧张素II受体1抗体(ANGⅡR1-Ab)ELISA试剂盒

    来源:上海笃玛生物科技有限公司 时间:2024-11-01 07:17:11 [举报]


    绵羊血管紧张素II受体1(ANGⅡR1-Ab)ELISA试剂盒






    ELISA:本法主要用于检测型特。该现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测。下面以AP2型的ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加工作量1:4稀释被检猪100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑦ 用ELISA检测仪测定OD值。本试验同时设阴、阳性对照、兔抗AP2型阳性对照、空白对照。



    ELISA (Enzyme-Linkedimmunosorbent assay)的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。这一的基本原理是:①使抗原或结合到某种固相载体表面,并保持其活性。②使抗原或与某种酶连接成酶标抗原或,这种酶标抗原或既保留其活性,又保留酶的活力。在测定时,把待测样本(测定其中的或抗原)和酶标抗原或按不同的步骤与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与其他分开结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检的量直接相关,所以可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。由于酶的催化速率很高,所以可地放大反应效果,从而使测定达到很高的度。







    ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检剂盒、ELISA Kit、酶联试剂盒、酶联吸附测定试剂盒、酶联分析试剂盒、酶剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检剂盒、酶联吸附测定试剂盒等。

    ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,全 科研工作者的认可及推崇,在欧美及很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。

    Elisa生物试验是一种性高,特强,重复性好的实验诊断。由于其试剂、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在学检验的各领域中。ELISA检剂盒适用于体外定性检测人或中的抗人类(HEV) IgM ELISA检测。








    绵羊血管紧张素II受体1(ANGⅡR1-Ab)ELISA试剂盒

    ELISA检剂盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经 次孵育后,酶结合物就会与 次孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa试剂盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。










    用途:



    ELISA的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其学活性,酶标记的抗原或既保留其学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的或抗原)与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与中的其他分开。再加入酶标记的抗原或,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了反应的结果,使测定达到很高的度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。



    然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其学的优点。








    产品特点:



    一、、灵敏、特异的;

    二、的重复性和可靠性;

    三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相载体;

    四、适用、、组织匀浆液、细胞上清液、等等多种标本类型;

    五、节省实验经费。

    elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为29.8mg/L,则认为回收率为99%。






    点ELISA:与常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特不够高等。该的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置37℃使纤维素膜干燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40-53个样品,每个压圈可加抗原液1-20μl。⑵ 封闭 将纤维素膜置于封闭液中,37℃感作15-30分钟。封闭液多采用含有正常动物、pH7.2或pH7.4的PBS。⑶ 加被检 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再加入一定量适度稀释的待检,37℃反应一定时间,用洗涤液洗三次,每次1-3分钟。洗涤液一般为一定浓度的PBS-Tween溶液。⑷ 加酶标,37℃反应一定时间后,用洗涤液洗三次。⑸显色 加入新鲜配制的底物液,37℃反应一定时间后,去掉底物液,加蒸馏水洗涤终止反应。⑹ 结果判定 以阳性、阴险作为对照,膜片出现深棕红色点者为阳性反应,否则为阴性反应。






    标记:良好的酶结合物取决于两个条件:即价的和高活性的酶。的活性和纯度对制备标记至关重要,因为特反应随活性和纯度的而增强。在酶标记中,的活性有所,故需要纯度高、效及抗原亲和力强的球蛋白使用亲和层析提纯的,可性,而且可稀释使用,非特吸附。

    标签:ELISA试剂盒,指标ELISA试剂盒,人ELISA试剂盒,吸附测定法

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  • 5天
  • 笃玛生物
  • 有限责任公司(自然人独资)
  • 2015-04-01
  • ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,标准
  • 上海 上海周边 上海市宝山区河曲路118号6981

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