上海笃玛生物科技有限公司
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  • 鸡黏着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒重复性好

    来源:上海笃玛生物科技有限公司 时间:2024-06-30 13:04:31 [举报]


    鸡黏着激酶(FAK)ELISA试剂盒 重复性好



    ELISA实验通用规则



    1、要移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。有人员进行矫正。



    2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的后,要更换枪头。即使是吸取品时。



    3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更。



    4、实验时,要使底物避光保存。



    5、用枪吸取时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。



    6、吸取时,要用量程和需要量接近的枪去吸,误差。



    7、将加到酶标孔中时,避免枪头和孔内,可使枪头上的液滴和孔壁,液滴会自然流下去。



    8、全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀。也可以用酶标仪的晃动功能。



    9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。



    10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去后,要将酶标板在报纸或毛纸上拍干。



    11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。



    12、底物是光的,要在临用前现配。



    13、检测前,要打开酶标仪,使之10分钟以上。



    14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免。



    15、待检样品要澄清,否则会影响结果。



    16、温浴时间应遵守试剂盒规定。



    17、应尽量做双孔实验,这样才能数据的准确性。



    18、对结果有疑问的样品要用其它进行确证。







    做好对照



    正式试验时,应分别以阳性对照阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特反应,可采用羊、兔或BSA等封闭。



    HBsAg试剂特点(检测:临床夹心法):包被为山羊多抗。多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。酶表为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,检测的特(99.98%)检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEI)HBsAg品,对ad品的灵敏度为0.05ng/ml对ay品灵敏度为0.025ng/ml



    ELISA90分钟一步法的优点主要包括:1.操作简单:该只需要一步操作即可完成,操作简单明了,易于。2.快速:ELISA90分钟一步法可以在短时间内完成,适合于大批量样品的快速检测。3.特高:该采用特定的或抗原进行固定和检测,因此具有较高的特。4.灵敏度高:ELISA90分钟一步法具有较高的灵敏度,可以检测出较低浓度的抗原或。5.重复性好:该的重复性,结果较为。6.安全性高:ELISA90分钟一步法不使用放射性同位素等有害,因此具有较高的安全性。需要注意的是,ELISA90分钟一步法也存在一些缺点,例如可能会受到非特因素的影响,结果不准确。此外,该的试剂成本较高,不适合于小规模样品的检测。






    鸡黏着激酶(FAK)ELISA试剂盒 重复性好





    实验条件的选择



    ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:



    (1) 固相载体的选择:许多可作为固相载体,如聚氯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。



    (2) 包被(或抗原)的选择:将(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。



    (3) 酶标记工作浓度的选择:用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度)在正式实验里准确地滴定其工作浓度。



    (4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMBABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。









     

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  • 笃玛生物
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  • 2015-04-01
  • ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,标准
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